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行業(yè)動態(tài)

切向流在細胞灌流培養(yǎng)與產(chǎn)物連續(xù)收獲

添加時間:2025-04-18 11:11:18   瀏覽次數(shù):505  

細胞灌流培養(yǎng)與產(chǎn)物連續(xù)收獲

應用場景
在哺乳動物細胞(如CHO細胞)培養(yǎng)中,通過TFF實現(xiàn)細胞截留,延長培養(yǎng)周期并提高產(chǎn)物(如抗體、病毒載體)滴度。

操作流程

  • ?系統(tǒng)配置:使用中空纖維膜包(如Repligen XCell ATF系統(tǒng)),膜孔徑0.2 μm,截留細胞但允許代謝廢物和產(chǎn)物通過。
  • ?灌流控制:蠕動泵以低流速(如10 mL/min)循環(huán)培養(yǎng)液,維持細胞密度至1×10^7 cells/mL。
  • ?產(chǎn)物收集:濾液中含有目標產(chǎn)物(如抗體),每日取樣監(jiān)測濃度并定期收集。
  • ?營養(yǎng)補充:根據(jù)消耗速率持續(xù)補加新鮮培養(yǎng)基,維持細胞活力。

優(yōu)勢

  • 培養(yǎng)周期可延長至30天以上,抗體產(chǎn)量提高3~5倍。
  • 避免傳統(tǒng)批次培養(yǎng)的頻繁換液操作,降低污染風險。

注意事項

  • 需優(yōu)化剪切力(泵速)以防止細胞損傷(CHO細胞通常耐受剪切力<50 dyn/cm²)。
  • 定期監(jiān)測膜堵塞情況(通過TMP升高判斷),必要時進行反向沖洗(Backflush)。
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